Cre工具鼠是一种基因敲除小鼠，可以通过Cre重组酶系统实现特定基因的敲除，在条件性靶基因功能研究、疾病模型研究等方面发挥着极大作用。而荧光报告Cre工具鼠作为Cre工具鼠的好搭档，又有哪些用途呢？集萃ob电竞官网入口 带你一探究竟。

什么是荧光报告Cre工具鼠？

利用基因工程技术手段，将“loxP-STOP-loxP (LSL)-Reporter gene”插入到小鼠基因组内，这样构建的小鼠模型就称为Cre报告工具鼠^[1]。常见的报告基因包括β-半乳糖苷酶（lacZ）报告基因、荧光素酶（luciferase）报告基因和荧光报告基因，以荧光蛋白作为报告基因的小鼠就称为荧光报告Cre工具鼠。常用的荧光报告基因包括绿色荧光蛋白EGFP/ZsGreen，黄色荧光蛋白EYFP，青色荧光蛋白ECFP，红色荧光蛋白mCherry/tdTomato等^[2]。

图1. Cre报告工具鼠策略图^[1]

当荧光报告工具鼠与Cre工具鼠杂交，双阳性子代通过Cre介导的重组使得报告基因在特定细胞类群中启动表达，从而实现了细胞荧光标记和谱系追踪^[3]，还可用于监测重组酶的活性和表达范围^[4]。荧光报告系统已被用于检测基因编辑效果，Alapati等人使用Rosa26-mT/mG双荧光报告小鼠证明在胎儿发育过程中CRISPR-Cas9基因编辑试剂在子宫内的精确定时递送会导致胎儿肺中靶向和特异性基因编辑^[5]。

除此之外，Cre常与Dre工具鼠联用进行谱系追踪[6]，记录肝脏中的细胞增殖^[7]，追踪癌症转移和纤维化中的EMT^[8]，并阐明心脏干细胞在心脏修复过程中的作用^[9]。

荧光报告Cre工具鼠模型优势

1.自发荧光，非酶促反应

较之于荧光素酶和β-半乳糖苷酶，荧光血清组织荧光不要“添加底物，成相轻松。

2.颜色多用

有不相同茶汤颜色的荧光蛋白酶质或蛋白酶质变体可供选定 ，同一时间信息显示各种各样体细胞种类。

3.定量分析

便用荧光显微镜或免疫印迹癌细胞术可酶联免疫法浅析荧光的较为表明构造。

图2. R26R-Confetti小鼠：随机多色的Cre荧光报告鼠^[3]

集萃ob电竞官网入口 荧光报告Cre工具鼠品系

1.红色荧光报告工具鼠 T058417 H11-CAG-LSL-tdTomato

本品系在全身上下抒发出的CAG开机启动子后相连接一种含带LSL编码序列的tdTomato，并将其敲入小鼠12号染色剂体的H11健康位点。当Cre合拼酶存有时，是由于loxP合拼，小鼠基因组组中的STOP误删除，tdTomato被抒发出并在led灯光增强公布出夺目的红颜色荧光。

图3. H11-CAG-LSL-tdTomato仿真模型手段展示图

部分验证数据展示：

图4. H11-CAG-LSL-tdTomato对模型荧光显像测量

Cre-：H11-CAG-LSL-tdTomato单抗体阳性小鼠；Cre+：Rosa26-EIIA-iCre,H11-CAG-LSL-tdTomato 双弱阳小鼠

2.绿色荧光报告工具鼠 T057823 Rosa26-CAG-LSL-EGFP-3xHA-WPRE-polyA

本品系在一身表现的CAG重新启动子后接其中一个有LSL编码序列的EGFP，并将其敲入小鼠-6染色的体的Rosa26安全性位点。当Cre重新组合酶具备时，仍然loxP重新组合，小鼠dna组中的STOP被移除，EGFPdna表现被激发，行成生态荧光血清。

图5. Rosa26-CAG-LSL-EGFP-3xHA-WPRE-polyA3d模型手段构造图

部分验证数据展示：

图6. Rosa26-CAG-LSL-EGFP-3xHA-WPRE-polyA模形荧光显像在线检测

Cre-：Rosa26-CAG-LSL-EGFP-3xHA-WPRE-polyA单阳型小鼠；Cre+：TgTn(pb-CAG-iCre)，Rosa26-CAG-LSL-EGFP-3xHA-WPRE-polyA 双呈阳性小鼠

3.双色荧光报告工具鼠 T006163 H11-CAG-LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato (B6-G/R)

本品系在满身把你想表达出来的CAG启动时子后衔接一款双荧光报表遗传什么是基因ZsGreen和tdTomato，并将其敲入小鼠 12号着色体的H11安全性高位点。当Cre并购从组酶存在的时，因此loxP并购从组，小鼠遗传什么是基因组中的ZsGreen和STOP被移除，小鼠将由满身泛绿变蓝成相应团体的红光。

图7. B6-G/R模特战略提醒图

部分验证数据展示：

图8. CAG-G/R整治荧光三维成像验测

Cre-：B6-G/R单阳性反应小鼠；

Cre+：Rosa26-EIIA-iCre，B6-G/R 双抗体阳性小鼠

图9. B6-G/R模式化流式生殖细胞术生殖细胞术阐述

Cre-：B6-G/R单弱阳小鼠，

Cre+：H11-Cd4-iCre，B6-G/R双阳型小鼠

相关品系：

用来上面3种荧光Cre用具鼠，集萃ob电竞官网入口 还个性化创新了多种不同荧光报表用具鼠，得到200+Cre用具鼠品系，50+报表鼠品系，铺盖神经软件操作系统软件操作系统、免疫力软件操作系统等很多调查科技领域。国际英文实名认证的宠物设施管理和严格执行的质控标准单位让调查更无优，追捧资讯熟知。

考生资料：[1]Li, Siang, and Cord Brakebusch. "Reporter Mice for Gene Editing: A Key Tool for Advancing Gene Therapy of Rare Diseases." Cells 13.17 (2024): 1508.[2]Ghim, Cheol-Min, et al. "The art of reporter proteins in science: past, present and future applications." (2010).[3]Snippert, Hugo J., et al. "Intestinal crypt homeostasis results from neutral competition between symmetrically dividing Lgr5 stem cells." Cell 143.1 (2010): 134-144.[4]Bittner-Eddy, Peter D., Lori A. Fischer, and Massimo Costalonga. "Cre-loxP reporter mouse reveals stochastic activity of the Foxp3 promoter." Frontiers in immunology 10 (2019): 2228.[5]Alapati, D., et al. "In utero gene editing for monogenic lung disease. Sci Transl Med 11." (2019).[6]Tang, Juan, et al. "Arterial Sca1+ vascular stem cells generate de novo smooth muscle for artery repair and regeneration." Cell stem cell 26.1 (2020): 81-96.[7]He, Lingjuan, et al. "Proliferation tracing reveals regional hepatocyte generation in liver homeostasis and repair." Science 371.6532 (2021): eabc4346.[8]Li, Yan, et al. "Genetic fate mapping of transient cell fate reveals N-cadherin activity and function in tumor metastasis." Developmental cell 54.5 (2020): 593-607.[9]Li, Yan, et al. "Genetic lineage tracing of nonmyocyte population by dual recombinases." Circulation 138.8 (2018): 793-805.